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角分辨散射仪的操作经验分享

发布时间:2022-06-22      点击次数:109
  角分辨散射仪是以特定频率入射光照射这些粒子,它们不吸收入射光能量,而仅作为二次波源向各个方向发射与入射光频率相同的球面散射光,这种没有频率位移(即无能量变化)的散射称为弹性光散射(elastic light scattering),也常称为经典光散射(classical light scattering)、静态光散射(static light scattering)在静态光散射情况下,通常用来表征一个体系的散射能力和角度依赖性。
  角分辨散射仪谱操作规程:
  1、开机前准备:水:蒸馏水,有机溶剂:色谱纯。缓冲盐溶液:配置完成后过2层0.22um滤膜。流动相需准备充足。
  2、系统平衡:根据需要选择凝胶柱以及需要连接的检测器。开启脱气机,泵、柱温箱、检测器以及电脑开关。点击quick start pump进行流速设置,点击ASTRA进行实验方法设置。提前24小时将流速调至试验所需流速进行系统平衡,其中注意流动相过渡问题,待检测器冲平后可进行进样分析。
  3、进样:建议标准样品归一化处理,用于激光18角度校正,建议进样前进行该处理。多糖需用3-5mg/mL分子量为五万以下的右旋糖酐进行激光,蛋白质以2-4mg/mL的BSA作为归一化样品。所以样品离心后取上层清液过0.45um滤膜。手动进样器扳至load状态进行进样,一般需进3-5倍进样环体积以清洗进样环,点击软件中运行后将进样器扳至Inject状态进行数据采集。
  4、数据分析:数据采集后需进行定基线、峰等数据处理,依据实验需要提前实验数据。所有数据可以通过图表中邮件中edit进行数据导出。
  5、关机:色谱柱和系统清洗-流动相冲洗2-3个小时,根据流动相性质选择合适溶剂过渡,如缓冲盐流动相冲洗后需用万分之二叠代钠清洗一晚上后换20%甲醇冲洗足够时间后,进行色谱柱保存,关闭仪器电源。实验完成后做好登记工作。


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